כמעט כל חנות פפטידים כותבת "טוהר 99%". השאלה היא מה עומד מאחורי המספר. את התשובה מוצאים בתעודת ה-COA. במדריך נסביר מה יש בתעודה, מה המספרים אומרים, ואיך מזהים תעודה שלא כדאי לסמוך עליה.
מה זה COA
COA הוא קיצור של Certificate of Analysis. בעברית: תעודת בדיקה, או תעודת אנליזה. זה מסמך שמעבדה מוציאה אחרי שבדקה דגימה של מוצר. התעודה עונה על שתי שאלות נפרדות:
- זהות: האם המולקולה בבקבוקון היא באמת זו שכתובה על התווית?
- טוהר: כמה מהחומר הוא המולקולה הזו, וכמה ממנו משהו אחר?
לכל שאלה יש בדיקה משלה. את הזהות בודקים ב-MS, ואת הטוהר ב-HPLC.
מה כתוב בתעודה
תעודה טובה כוללת בדרך כלל את הפרטים האלה:
- שם המוצר, ולפעמים גם הרצף או הנוסחה המולקולרית.
- המסה המולקולרית התיאורטית (MW).
- שם המעבדה שביצעה את הבדיקה.
- תאריך הבדיקה.
- מזהה שמקשר את התעודה למוצר מסוים, למשל קוד אימות.
- תוצאת HPLC: אחוז טוהר, ולצידו הכרומטוגרמה.
- תוצאת MS: המסה שנמדדה בפועל.
- מראה החומר, למשל "אבקה לבנה".
HPLC: איך קוראים את אחוז הטוהר
HPLC היא כרומטוגרפיה נוזלית בלחץ גבוה. מעבירים כמות קטנה מהדגימה דרך עמודה מיוחדת, וכל רכיב בדגימה יוצא ממנה בזמן אחר. גלאי בקצה העמודה רושם מתי יצא כל רכיב וכמה היה ממנו.
התוצאה היא גרף שנקרא כרומטוגרמה. הציר האופקי הוא זמן, והאנכי הוא עוצמת האות. כל רכיב מופיע כפסגה (peak).
ככה קוראים אותו:
- בפפטיד טהור תראו פסגה אחת גבוהה ודומיננטית. זה הפפטיד.
- פסגות קטנות סביבה הן זיהומים, למשל שרשראות שחסרה בהן חוליה.
- אחוז הטוהר מחושב לפי השטח שמתחת לפסגה הראשית, ביחס לשטח של כל הפסגות יחד.
כלומר, 99.2% אומר שהפסגה הראשית תופסת 99.2% מכל מה שהגלאי ראה. הזמן שבו הפסגה הראשית יוצאת נקרא retention time. בבדיקות של אותו פפטיד, באותם תנאים, הוא אמור להיות עקבי.
טוהר זה לא תכולה
נקודה שמבלבלת הרבה אנשים: אחוז הטוהר ב-HPLC הוא לא אחוז המשקל של הפפטיד בבקבוקון. אבקה ליופילית מכילה גם מעט מים ויוני נגד (counter-ions), למשל אצטט או TFA, שנשארים מתהליך הייצור. ב-HPLC הם לא נספרים כזיהומים. לכן גם בפפטיד בטוהר 99%, כמות הפפטיד נטו (net peptide content) יכולה להיות נמוכה ממשקל האבקה. זה תקין, וזה לא אומר שמשהו לא בסדר במוצר.
MS: איך מוודאים שזו המולקולה הנכונה
ספקטרומטריית מסות (Mass Spectrometry) שוקלת מולקולות. המכשיר הופך אותן ליונים ומודד את היחס בין המסה למטען שלהן. מהנתון הזה מחשבים את המסה המולקולרית.
בתעודה תראו שני מספרים:
- מסה תיאורטית: מה שהמסה אמורה להיות לפי הרצף.
- מסה נמדדת: מה שהמכשיר מדד בפועל.
אם המספרים כמעט זהים, זה אישור שהמולקולה נכונה. ההפרש המקובל הוא בדרך כלל שבר של דלטון (Da), תלוי ברזולוציה של המכשיר. הפרש גדול יכול להעיד על רצף אחר, על חוליה חסרה או על שינוי כימי.
לפעמים מופיעים כמה ערכים, כמו [M+H]+ או [M+2H]2+. אלה אותה מולקולה עם מטען שונה, והמעבדה מתרגמת אותם חזרה למסה אחת.
למה צריך את שתי הבדיקות? כי HPLC לבד לא יודעת מה היא מודדת. חומר יכול להיות טהור מאוד, ועדיין להיות המולקולה הלא נכונה. ו-MS לבד לא אומרת כמה זיהומים יש. רק ביחד הן נותנות תמונה מלאה.
סימני אזהרה בתעודה
כמה דברים שכדאי לשים לב אליהם:
- אין כרומטוגרמה. יש רק מספר, בלי הגרף שממנו הוא נלקח.
- טוהר 100%. בפועל כמעט תמיד יש פסגות קטנות. מאה עגול נראה טוב מדי.
- אין שם מעבדה או תאריך. אי אפשר לדעת מי בדק ומתי.
- אותה תעודה לכל המוצרים. אותו גרף בדיוק, רק עם שם אחר בכותרת.
- אין בדיקת MS. יש טוהר, אבל אין אישור לזהות.
- המסה הנמדדת רחוקה מהתיאורטית, או שהמסה התיאורטית בכלל לא תואמת את הפפטיד.
- אין קשר למוצר שקיבלתם. תעודה כללית, בלי מזהה שמופיע גם על הבקבוקון.
- בדיקה של הספק עצמו בלבד. בדיקה במעבדה חיצונית אמינה יותר.
הסעיף שלפני האחרון חשוב במיוחד. תעודה מצוינת לא שווה הרבה אם אין דרך לדעת שהיא שייכת לבקבוקון שבידיים שלכם.
איך זה עובד ב-MedicPeptide: קוד אימות
כאן נכנס קוד האימות. על כל בקבוקון של MedicPeptide מודפס קוד, והוא מקשר בין הבקבוקון לבין תוצאות הבדיקה של המוצר.
איך בודקים:
- מוצאים את הקוד על התווית של הבקבוקון.
- נכנסים לעמוד אימות מוצר ומזינים אותו.
- אם הקוד תקין, מופיעים פרטי הבדיקה: אחוז הטוהר, שם המעבדה, תאריך הבדיקה ותעודת ה-COA.
הקוד לא נמצא? בדקו שהקלדתם אותו נכון. אם הוא עדיין לא מופיע, פנו אלינו או כתבו לנו בוואטסאפ ונבדוק.
כל מוצר שלנו נבדק במעבדה חיצונית, ב-HPLC וב-MS. את כל התעודות אפשר לראות בעמוד בדיקות מעבדה, גם לפני שמזמינים. למשל, לפני שמוסיפים לסל GHK-Cu, אפשר לבדוק מה הראתה הבדיקה שלו.
לסיכום
- COA עונה על שתי שאלות: מה החומר (MS) וכמה הוא טהור (HPLC).
- אחוז הטוהר נלקח מהכרומטוגרמה. בלי הגרף, קשה לסמוך על המספר.
- טוהר הוא לא אותו דבר כמו כמות הפפטיד נטו.
- הכי חשוב: תעודה שמקושרת לבקבוקון שקיבלתם, דרך קוד שאפשר לבדוק בעצמכם.
רוצים להתחיל מהבסיס? קראו מה זה פפטידים. יש עוד שאלות? חפשו בעמוד שאלות נפוצות.
לתשומת לבכם: המידע במאמר נועד להסבר מדעי בלבד. כל המוצרים ב-MedicPeptide מיועדים לשימוש מחקרי ומעבדתי בלבד, ואינם מיועדים לשימוש בבני אדם או בבעלי חיים.